首班车时间以线路为准，1-5号线的首班车时间如下（2021.9）
1号线： 往木渎方向首发列车时间为6：16 往莲花浜方向首发列车时间为6：47
2号线： 往广济南路站方向首发列车时间为6：30 往石湖小区南站方向首发列车时间为6：48
3号线： 往新庄立交站方向首班车时间为6：30 往苏州园区火车站方向首班车时间为6：48
4号线： 往龙道浜方向首班车时间为6：30 ，往同里方向首班车时间为6：48
5号线： 往奥体中心东站方向首班车时间为6：48，往太湖香山北站方向首班车时间6：55
备注：首班车时间因季节变化会略有调整，具体以车站提供时间为准。
甄仪天优质答主苏州地铁一号线每天5：15从钟南街站和星海广场站始发第一班车，23：00左右结束末班车运营。在14小时45分钟的运营时间内，全天开行220个单程列车，最小行车间隔为5分45秒，高峰期上线运营的列车达到22列。
苏州地铁一号线开通初期运营时间为100分钟，运营服务时间为5:15～23：00，全天开行220个单班车次，即始发站每天开出110个车次。工作日高峰时段行车间隔为5分45秒，平峰时段行车间隔为7分25秒;双休日及国定节假日平峰行车间隔为7分钟。正常运营时，乘客需等待的最长时间间隔为7分30秒，最短的间隔为5分30秒。
为了满足部分乘客晚间出行时错过地铁末班车的换乘需要，2月13日起，苏州公交夜1路、夜2路与1号线实行无缝驳接，夜1路的钟南街站与1号线星海广场站驳接，夜2路的星海广场西站与1号线钟南街站驳接，首班车的发车时间分别于两地铁站末班车到站后5分钟同时发车。
